顯微拉曼光譜儀是將拉曼光譜分析技術(shù)與顯微分析技術(shù)相結(jié)合,用于對樣品微區(qū)進(jìn)行分子結(jié)構(gòu)分析的儀器。顯微拉曼光譜儀主要用于微區(qū)化學(xué)成分分析,可實現(xiàn)非破壞性檢測和微米級空間分辨率的物質(zhì)成分鑒定。
顯微拉曼光譜儀的核心原理是拉曼散射效應(yīng)。當(dāng)單色激光(如532nm、632.8nm或785nm)照射樣品時,大部分光線發(fā)生瑞利散射(頻率不變),而少量光線因分子振動或轉(zhuǎn)動能級躍遷產(chǎn)生頻率變化,形成拉曼散射光。這種頻率變化與物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)直接相關(guān),每種物質(zhì)具有拉曼光譜“指紋”。通過共焦光路設(shè)計,儀器聚焦激光束到微米級區(qū)域(如1-2μm光斑),結(jié)合高分辨率顯微鏡和CCD探測器,可準(zhǔn)確捕獲散射光信號并解析為光譜數(shù)據(jù)。
主要功能
微區(qū)分析:可將激發(fā)光的光斑聚焦到微米量級,對樣品的微區(qū)進(jìn)行準(zhǔn)確分析,通過 CCD 鑒定儀和 TV 監(jiān)視儀,能清晰顯示激光作用的部位,可選擇感興趣的樣品部位進(jìn)行分析。
分子結(jié)構(gòu)鑒定:基于不同物質(zhì)的拉曼光譜具有特征性,可從分子水平上反映樣品化學(xué)組成和分子結(jié)構(gòu)上的差異,從而對樣品中的物質(zhì)進(jìn)行定性鑒定。
操作要點
環(huán)境控制:在防震、恒溫(20±5℃)環(huán)境中操作,避免振動和溫度波動影響數(shù)據(jù)精度。
定期檢定:使用標(biāo)準(zhǔn)光源(如汞燈)校準(zhǔn)波數(shù)精度、分辨率及重現(xiàn)性,確保儀器性能穩(wěn)定。
樣品處理:根據(jù)樣品性質(zhì)選擇合適波長激光,避免熒光干擾;液態(tài)樣品需控制厚度,防止散射光衰減。
安全防護(hù):激光可能對眼睛造成傷害,操作時需佩戴防護(hù)眼鏡,避免直視光路。